克伦特罗ELISA快速检测方法

克伦特罗属于β-兴奋剂类药物，可以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物生长。8.3当板间差异性大时，可能原因是板与板之间孵育时间相差太大，板与板之间洗涤不一致，移液枪使用不当，温度不同等。

克伦特罗属于β-兴奋剂类药物，可以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物生长。目前由于多起克伦特罗中毒事件且出现了死亡案例，因此被禁止使用。克伦特罗ELISA快速检测试剂盒与经典色谱法相比，具有操作过程简单、样品处理快捷，可同时分析多个样品，分析时间短、成本低、灵敏度高且对环境污染小等优点。

1原理

ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。

2试样的准备

2.1对于尿样可直接用于检测，或者样品比较浑浊时，可适当离心。当尿样冷冻时，应将尿样回温再测。

2.2饲料样品要按照说明书的处理步骤进行。当然，为保证样品充分被提取，可适当延长涡旋时间、离心时间及离心转数。

3试剂的准备

3.1不同批次的试剂盒不能混用，因为抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。

3.2按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。

3.3从冰箱中取出的实验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次实验不需用的部分应及时放回冰箱保存。

3.4检测过程中应尽量保持室温20~25℃，避免在通风口操作，温度过低、过热或蒸发都会影响检测数据的准确性。同样不应再阳光直射下实验，防止过热或蒸发带来影响。

4加样

4.1在ELISA中一般有4次加样步聚，即加标本或样品、酶结合物、底物、终止液。加样时应将所加物加在板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡，当有气泡时可用干净的枪头小心刺破。

4.2加标准及样品时一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中，每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染。

4.3在加酶标物、底物、终止液时，建议尽量使用多道移液枪，以缩短反应时间。尤其是酶标物和底物液用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。当然，多道移液枪适合整板样品的检测，加酶标物、底物、终止液时可整瓶加入。如果只需要对少量样品检测时，加酶标物、底物、终止液动作一定要迅速、准确，避免枪头碰壁或液体溅出。