马磊，冯迎春，杨胜，颜其贵
四川农业大学动物生物技术中心
猪蓝耳病又叫猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征（PRRSV）引起的高度接触性传染病，以妊娠母猪的繁殖障碍，如流产、死胎和木乃伊胎等及各种年龄猪特别是仔猪的呼吸道疾病为特征，现已经成为规模化猪场的主要疫病之一，我国将其列为二类传染病。猪巴氏杆菌病是由猪巴氏杆菌引起的一种急性、热性传染病，一年四季均可发生。在南方该病大多发生于潮湿闷热气候及多雨季节，引起猪的败血病等，若防治措施不当，会导致高死亡率。二者极易造成混合或继发感染，为猪场健康养殖增加了难度，也为养殖户造成了一定的损失。
1发病情况和临床症状
2010年10月四川省某野猪场部分母猪分娩出现诸如产死胎、无乳和产期提前等繁殖障碍现象，并且有部分母猪出现死亡。基本症状为：体温升高至40℃～41℃；厌食，逐渐消瘦；呼吸困难，喜伏卧；咳嗽、眼分泌物增多、结膜炎；尿呈黄色等症状。
2剖检病变
对死亡母猪进行解剖发现，颌下和肺门淋巴结肿大出血，肺淤血、水肿，黏膜出血，肝脏肿大、表面有纤维素性渗出物，脾脏、肾脏肿大、有出血点，严重的腹膜炎，胸腔和腹腔积液。胃肠道均有不同程度的出血点，肠系膜淋巴结出血肿胀。
3实验室诊断
根据发病特点、临床症状、尸体剖检病变作了以下实验室检测。
3.1病毒检测
取病猪肺脏、脾脏、淋巴结及血液研磨匀浆，提取病料RNA，参照曹洪志建立的猪常见繁殖障碍性疾病的多重PCR诊断方法对PRRSV（蓝耳病病毒）、CSFV（猪瘟病毒）进行了检测。RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测，结果显示PRRSV核酸呈阳性，CSFV核酸呈阴性。
3.2细菌分离及生化鉴定
取病变组织肺脏、肝脏及脾脏触片，瑞氏染色后显微镜下观察，可见两极浓染的蓝色较小的杆菌，多成双排列。用接种环取组织深部样品无菌接种普通肉汤、10%血清肉汤、普通琼脂平板、10%血清平板、血平板、麦康凯平板及巧克力平板进行细菌分离培养。经37℃培养12h～48h观察，普通肉汤、普通琼脂平板及麦康凯平板未见细菌生长，10%血清肉汤变浑浊，10%血清平板、血平板和巧克力平板上长了大量灰白色半透明小菌落，表面光滑湿润，菌落形态一致，其中血平板培养时长出很明显的水滴样菌落，周围未见溶血现象。挑取单个菌落革兰氏染色镜检可见红色（G-）短小杆菌和球杆菌，两端钝圆，成双排列，菌体周围有一圈不易着色的荚膜。经以下生化鉴定结果，初步判定为巴氏杆菌。
3.316SrRNA基因分析
用16SrRNA通用引物PCR扩增细菌16SrRNA，PCR产物电泳结果显示，条带大小约1600bp。将PCR产物送往上海英俊生物技术有限公司进行核酸序列测定，测序结果经GenBank的BLAST比对发现，该菌与巴氏杆菌16S基因相似性最高，为99%。
经以上细菌培养及染色特性观察、16S鉴定，确定该菌为巴氏杆菌。
3.4药敏试验
挑取单菌落经10%血清肉汤增菌培养后进行药物敏感试验。依据药敏试验结果分析，从该病例中分离出来的此株巴氏杆菌对大多数头孢类和某些抗生素敏感，头孢氨噻肟和杆菌肽处于中介，对洁霉素、磺胺嘧啶等已产生耐药性。推荐使用该株巴氏杆菌敏感的头孢美唑等药物进行抑菌治疗。
4防治
根据诊断结果对该猪场制定了综合防治方案。
4.1隔离消毒
4.1.1对发病猪只进行紧急隔离，防止各种形式的疾病传播，而对于无治疗意义的猪只则建议立即淘汰，淘汰猪、病死猪作无害化处理。
4.1.2酸性消毒药（如：5%的次氯酸等）和碱性消毒药（如：生石灰等）交替使用，对猪舍内外环境及带猪圈舍进行消毒，每天一次。
4.1.3严禁内部工作人员、外界人员和运输车辆随意进出，必须进出饲养场地时，严格做好进出时的人员及车辆的消毒工作。各栋猪舍的饲养员严禁互串。
4.2提高猪群抵抗力
改善和加强饲养管理，减少各种应激，在猪只采食的日粮或饮水中添加猪用干扰素、黄芪多糖、多维或微量元素，提高猪只机体免疫力。在饲料中添加适量香味剂、诱食剂等，增强猪只食欲。
4.3紧急接种
预防病毒性疾病对受威胁猪及健康猪使用蓝耳病活疫苗进行一次强化免疫。
4.4细菌性疾病的预防和治疗
联合使用抗菌和抗病毒药物。根据药物敏感性试验结果选用阿奇霉素或哌拉西林等本菌敏感药物拌料，对体温升高病例，在使用抗生素的同时，可在饮水中加入适量葡萄糖、钾盐、钠盐等补液，以维持机体的内环境稳定。用安乃近或中药方剂清热败毒散，拌料饲喂。发病严重不食的猪采用肌注给药。
在采用上述方案预防和治疗1个星期后，无新增病例出现，有效控制了本次疾病的进一步发展。
5讨论与小结
目前，已经出现多种以猪呼吸系统异常为主要症状疾病，主要包括猪蓝耳病、猪瘟、猪链球菌病、猪流行性感冒、猪巴氏杆菌病等。此类疾病的主要临床症状极为相似，均以体温升高，食欲减退和呼吸困难等为主，是规模化猪场的主要疫病。如果猪场出现某种疾病长期的持续性感染，造成猪只机体免疫力下降，就会使其他病毒性疾病如猪瘟等的感染率大大提高，与此同时，更易引起巴氏杆菌、链球菌、放线杆菌和/或副猪嗜血杆菌等细菌与病毒的混合感染，使临床诊断、治疗以及疫病的防控增加了难度。类似此例猪蓝耳病和猪巴氏杆菌混合感染在养猪业中的巨大危害，我们应充分考虑临床预防和治疗用药，应在药敏试验的基础上选择高敏感抗菌药物，采用合适的给药途径进行预防性、治疗性给药，同时做好病毒性和细菌性疾病的预防和治疗。同时，猪巴氏杆菌病可用疫苗预防，建议将猪巴氏杆菌病的免疫纳入以后的免疫程序中。
6建议
野猪饲养是中国近年来新发展起来的养殖产业之一，由于属于野生动物，大批量集中饲养缺乏可参照的规程，饲养管理模式和免疫程序都在摸索和总结之中。本起野猪场发生的蓝耳病继发猪巴氏杆菌感染病例，发现及时，但治疗相对偏晚，给猪场带来了一定的损失。鉴于此，建议各养殖户在包括猪只在内的养殖过程中，根据养殖对象的日常行为、精神、采食和粪便等判断其健康状况，对各种疾病尽量做到早发现早治疗。同时，在发现养殖对象身体状况异常时，除了进行初步用药外，要及时依据各种疾病的流行病学、临床症状、病理解剖及示病特征等快速准确地做出诊断，必要时及时送检相关单位或请相关人员及时诊断，避免因滥用药物和错过最佳治疗时机对疾病的治愈带来困难。
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